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酶標儀與分光光度計有什么區別,它們的優缺點又是什么?
發布時間:2020-03-31   點擊次數:1628次
   酶標儀和分光光度計都是實驗室常用的分析測量工具,它們的測定原理是相同的,都是使用朗伯-比耳定律,測定的都是樣本的吸光度。那么它們之間又有哪些區別呢?下面我來為大家講解下它們的區別!

  一、酶標儀和分光光度計的三大差別

  酶標儀即酶聯免疫檢測儀。是酶聯免疫吸附試驗的儀器又稱微孔板檢測器??珊唵蔚胤譃榘胱詣雍腿詣?大類,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析。測定一般要求測試液的終體積在250μL以下,用一般光電比色計無法完成測試,因此對酶標儀中的光電比色計有特殊要求。
 

  分光光度計,又稱光譜,是將成分復雜的光分解為光譜線的科學儀器。測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區和波長范圍為200~380 nm的紫外光區。不同的光源都有其特有的發射光譜,因此可采用不同的發光體作為儀器的光源。

  同為,實驗室內測定吸光度的儀器,酶標儀和分光光度計存在一些不同之處,具體差別體現在以下三個方面:

  (1)盛裝待測溶液的容器:

  分光光度計用的是比色皿,酶標儀使用的是塑料微孔板(酶標板)。比色皿只能起到盛裝溶液的作用,每個比色皿一次只能盛裝一種溶液。酶標板常用透明的聚乙烯材料制成,對抗原抗體有較強的吸附作用,因此用它作為固相載體,酶標板通常為48孔或96孔,每個微孔可以盛裝不同的溶液。

  (2)光路的方向:

  分光光度計是水平光路,而酶標儀則是垂直光路。由于酶標板盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過,因此酶標儀的光束都是垂直通過待測溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過比色液。垂直光的特點是標本吸光度受液體濃縮或稀釋的影響小,不足之處是受被測樣本液面是否水平、酶標板透光性、孔底是否平整等的影響較大。

  (3)光路的長度:

  由于光密度(OD值)與吸光系數, 待測組分的濃度以及光路長度成正比關系。

  分光光度計采用的比色杯的寬度通常是1cm,所以光路長度固定為1cm。因此不同儀器,不同批次測量的數據具有同樣的可比性。

  而酶標儀采用的是垂直光路, 所以光路的長度應該是液體液面的高度。所以測得的值受到樣品的體積的影響。

  二、酶標儀和分光光度計的優缺點比較

  分光光度計:

  優點:1、檢測波長范圍較寬;2、加樣量不一致對測量結果沒有影響。

  缺點:1、工作量大,操作繁瑣,耗時;2、耗試劑;3、結果穩定性差,重復性較差,誤差較大;4、對于微量物質,難以檢測到。

  主要應用領域:藥品檢驗、藥物分析、環境檢測、衛生防疫食品、化工、科研等領域對物質進行定性、定量分析。

  酶標儀:

  優點:1、一次性處理樣品量大,省時;2、樣本、試劑用量少;3、操作簡單,重復性好,檢測速度快、效率高。

  缺點:1、酶標儀96孔板在紫外光區有較強的紫外吸收,應盡量避免在300nm以下使用酶標儀進行含量測定;2、必須確保微孔板每個孔加樣量嚴格一致,對實驗者的操作技能提出了更高的要求。

  主要應用領域:臨床檢驗、生物學研究、農業科學、食品和環境科學等。

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